卵巢储备功能,又称卵巢储备(ovarian reserve,OR),是指卵巢产生卵子数量和质量的潜能,间接反映卵巢的功能。
体外受精与胚胎移植(IVF-ET)治疗过程中,控制性超排卵(COH)并获得多个成熟的卵子是治疗成功的关键,而COH的效果又取决于卵巢的反应性。卵巢的反应性主要由卵母细胞的数量和质量,即卵巢储备功能来决定。
卵巢储备减低(DOR)在人群中的发生率约为10%。卵巢储备功能减退受多种因素影响,主要为以下几点:
年龄
卵巢手术
盆腔放疗或化疗
吸烟
感染
卵巢血供下降
基因
免疫系统异常
正确评估卵巢的储备有利于确立个体化的COH方案。目前在临床上应用的评估卵巢储备的主要指标为:
年龄
基础卵泡刺激素(FSH)
FSH/LH(黄体生成素)
基础抑制素B(INHB)
基础抗苗勒管激素(AMH)
基础雌二醇(E2)
氯米芬激发试验(CCCT)
FSH卵巢储备试验(EFORT)
促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)
激发试验(GAST)
基础窦卵泡数
卵巢体积
卵巢间质动脉血流
年龄
生育期妇女的生物年龄是预测卵巢储备功能的一个独立指标,也是临床上应用最广泛、最方便、最简单的指标。尤其是35岁以上的高龄妇女其生育能力下降更加明显,其原因在于卵巢储备功能的降低,卵巢储备降低可能发生卵巢低反应。研究发现,年龄与卵巢反应性密切相关,35岁以后,卵泡的数量急剧下降,具体表现为:
卵子细胞核异常(包括纺锤体异常和非整倍体异常)
颗粒细胞的增殖率也下降但凋亡率同时升高
黄素化颗粒细胞激素水平也急剧下降
38岁以后卵泡的闭锁明显加速
40岁以上被公认为是卵巢低反应的高危因素。
高龄妇女在进行IVF治疗时卵巢反应性降低,使用Gn剂量增加,获卵数减少,卵子质量下降,胚胎着床率降低、临床妊娠率减少,流产率增加,分娩率下降。即使获取的卵母细胞数量没有降低,但是妊娠率仍然低下,卵母细胞的数量并不能完全弥补卵母细胞的质量下降。
但是单纯用年龄因素评价卵巢储备能力具有很大的局限性。因为有的妇女从近30岁时即已开始不能生育,而有的妇女到50余岁时仍能妊娠,所以需要结合其它指标进行更确切的评价。
2.基础FSH(月经D2-3)
月经周期第2~3天(D2~3)的FSH值称为基础FSH值(basal FSH,bFSH)。基础FSH水平升高提示卵巢储备功能下降。具体的判读方式为:
FSH水平<10IU/L为正常,可能为卵巢正常反应
FSH>10~15IU/L,预示卵巢低反应;
FSH>20IU/L,为卵巢早衰隐匿期,预示着1年后可能闭经。
单用基础FSH不能准确地预测卵巢低反应,除非用较高的阈值(20~25IU/L)。基础FSH水平升高对年轻健康和月经规律妇女的预测价值相当有限。小于35岁的年轻妇女基础FSH升高预示卵巢储备下降、卵巢反应性降低,而非卵子的质量问题,但是周期妊娠率和累计妊娠率降低,可能伴流产率增加。基础FSH随年龄的增长而升高。
基础FSH水平和诱发排卵及体外受精的成功率有密切关系。当FSH>8.78IU/L时获卵数最低,而受精率和优质胚胎率最高。当卵巢储备下降及对促性腺激素反应减退,同时INHB下降时,垂体激素代偿性的分泌量增加使FSH值上升。有数据表明,在一些妇女中即使是轻微的FSH值升高也预示着5年内绝经即将来临。
当FSH升高时妊娠率(IVF)明显下降,有数据显示为:
FSH<15IU/L时,其妊娠成功率约24%
FSH15~24.9IU/L时,妊娠率约13%
FSH>25IU/L时,妊娠率仅为5%
3.基础FSH/LH(月经D2-3)
月经周期第2~3天的FSH/LH比值可以作为评估卵巢储备的指标,FSH/LH是反映卵巢年龄的标志,是卵巢年龄开始老化的预警指标,但也有部分患者是亚临床型功能性性腺功能减退。FSH/LH是卵巢对Gn反应性的标志,具体表现为:
若FSH/LH比值升高>2~3.6,即使基础FSH水平正常,但LH相对降低也预示卵巢储备降低,促排卵时卵巢低反应。
基础FSH/LH比值较基础FSH、基础E2更能敏感的反映卵巢储备功能。
若基础FSH、LH和E2值正常,基础FSH/LH比值升高,提示可能为卵巢功能减退。
LH水平降低可能影响卵巢对Gn的反应性,在超排卵中需要增加Gn剂量,或可能需要添加LH
4.基础雌二醇(E2,D2-3)
月经周期第2~3天的E2值称为基础E2值。E2是由两种卵巢细胞(颗粒细胞和卵泡膜细胞)产生的,因此把E2作为反映卵巢储备功能的标志。基础E2水平升高提示卵巢储备功能下降。
基础E2水平升高可能是基础FSH升高前卵巢储备功能降低的表现,其升高早于基础FSH水平的升高。
若基础FSH正常、E2升高者,是界于卵巢功能正常和衰竭之间的中间阶段,即卵巢衰竭隐匿期。这是因为卵巢功能降低时,FSH逐渐升高,在一定程度上FSH刺激卵巢基质和颗粒细胞产生多的E2,E2负反馈作用于垂体又使FSH分泌降低,出现了FSH正常而E2升高,随着年龄及卵巢功能衰竭,就会出现高FSH、LH,低E2状态。
无论年龄与FSH水平如何,当D3 E2>80pg/ml,在促排卵的过程中,会因卵巢反应低或无反应而使周期取消率上升,临床妊娠率下降
E2水平反映卵泡活性,在月经周期的早期处于较低水平(<50pg/ml),以后稳步上升至排卵前达到最高峰。在月经早期出现高水平的E2值提示了卵泡发育的不恰当或不同步,上一周期存留的卵泡可能会干扰下一个周期卵细胞的发育和产生对Gn的低反应力。这些低反应的不同步的卵泡会产生大量的E2而通过负反馈抑制垂体FSH,造成即使卵泡质量差而FSH值仍较低的假象。
5.础抑制素B
尽管基础FSH、E2水平正常,也可发生卵巢低反应,这时我们要参考抑制素B。
月经周期第2~3天的抑制素B(inhibin,INHB)值称为基础INHB值。基础INHB<45pg/ml提示卵巢储备功能下降,INHB水平在FSH、E2上升之前,已开始下降,因此认为,INHB是预测卵巢储备功能的敏感性指标。
由于INHB主要由卵泡期正在发育的卵泡簇分泌,因而INHB较FSH更能直接反映卵巢的储备。
INHB是由生长的窦前和窦状卵泡的颗粒细胞产生。抑制素-A主要在黄体期分泌(由优势卵泡及黄体分泌),INHB则主要在卵泡期分泌(由中小窦状卵泡分泌),并可选择性地抑制FSH的分泌。
INHB的主要生理作用是对垂体FSH的合成和分泌具有负反馈调节作用,并在卵巢局部调节卵泡膜细胞对Gn反应。在COH周期INHB受Gn的调控,故测定INHB可对卵巢反应性做出及时评价,优于血清其他项目检查。INHB在月经周期中上下波动,在早中卵泡期有一个分泌高峰,并且在35岁以上妇女中INHB值明显升高。
INHB由小的窦状卵泡产生,基础卵巢内小窦状卵泡数量与基础INHB值是正相关基础FSH、体重指数与INHB呈负相关,因此,INHB水平代表窦卵泡的数目,其预测卵巢反应的敏感性优于基础FSH水平。INHB水平下降说明窦卵泡数目减少,提示卵巢储备功能降低,生育能力下降。
6.基础抗苗勒管激素
月经周期第2~3天的抗苗勒管激素(anti-Mullerian hormone,AMH)值称为基础AMH值。AMH是由卵巢窦前卵泡和小窦卵泡的颗粒细胞分泌。AMH是卵泡生长发育的调节因子,AMH参与生理性卵泡形成过程中的两次重要募集:始基卵泡募集和优势卵泡募集。AMH通过旁分泌抑制卵泡从始基卵泡池进入生长卵泡池,从而调控始基卵泡的募集。AMH在始基卵泡向生长卵泡的转换期和早窦卵泡期通过AMH受体直接或间接影响卵泡的发育过程,可抑制卵泡的生长,防止卵泡过快过早消耗,保存卵巢的储备功能。过高的AMH对卵泡的生长和发育有抑制作用,缺乏AMH的卵泡对FSH更敏感。
AMH水平在PCOS患者呈2~3倍增加,而其2~5mm卵泡的数目也增加2~3倍。
随着卵泡逐渐增大,AMH生成逐渐减少至消失,>9mm的卵泡几乎AMH表达。AMH随年龄增加而下降,至绝经前和绝经期检测不出,是预测卵巢储备的标志物。
窦卵泡数目(AFC)代表卵巢中卵泡的数量,年龄代表其中卵子的质量,AMH对于数量和质量都有体现,反映了卵泡池中在外源性FSH刺激下可生长卵泡的规模。
在卵巢储备下降的一系列事件中,AMH的改变相对而言是最早的。对于有正常排卵性月经的女性而言,AMH比FSH、AFC和INHB更能准确反映卵巢生殖功能的下降和预测即将到来的绝经过渡期
基础AMH<1.26μg/L用于预测卵巢储备能力降低的敏感性可达97%,高度提示卵巢储备降低,但需用AFC进一步证实。
接受IVF/ICSI治疗的患者血清及卵泡液中AMH水平越高则受精率越高。因此,AMH可能成为预测受精率的指标。AMH预测妊娠结局的作用明显优于FSH。预测卵巢低反应时AMH与AFC的作用无显著差别。预测OHSS优于年龄和BMI。发生OHSS患者的基础AMH较正常人高6倍,提示AMH可能提前预测OHSS。
AMH水平不受垂体Gn的影响,在整个月经周期中数值变化不大,保持较恒定的水平,故AMH是唯一既能在卵泡期又能在黄体期进行测定的卵巢储备标志物
7.氯米芬激发试验
氯米芬激发试验(clomiphene citrate challenge test,CCCT)方法为月经第3天测基础FSH值,月经第5~9天每天口服氯米酚(CC)100mg,D10再测FSH值。结果判断:
卵巢储备功能差的患者第3天FSH可能在正常范围,但第10天FSH>10IU/L或服药前后FSH值之和>26IU/L,E2轻度上升,此为CCCT异常,预示卵巢储备下降和卵巢低反应。
卵巢储备功能好的妇女,FSH水平会轻度上升或维持原水平,E2成倍上升。
该方法的机制可能是CC的抗雌激素作用可减弱雌激素对下丘脑的反馈抑制,促使垂体FSH分泌增加,FSH水平上升。但在卵巢储备和卵巢反应性良好的患者,其生长发育中的卵泡所产生的E2和INHB足以对抗CC激发的FSH水平过度上升
龄≥35或<35岁、既往有卵巢或/和输卵管手术史、多次促排卵史(尤其是超促排卵史),基础FSH增高的不孕妇女,CCCT可作为常规了解卵巢储备功能的一项检测方法。>40岁的人群中,CCCT诊断价值不大,说明除卵巢本身以外,还有一些随着年龄增长而改变的其他生殖系统方面的问题。对CCCT异常的不孕症患者,应根据不孕的病因积极处理,适当进行ART治疗。
8.GAST(GnRH-a激发试验)
GnRH-a对垂体的刺激作用是天然GnRH的50~300倍,在用药初期由于GnRH-a与垂体的GnRH受体结合后,可迅速而短暂地刺激垂体促性腺细胞释放大量的Gn,即GnRH-a的初始“激发效应”(flare-up)。利用GnRH-a的flare-up作用检测卵巢储备功能,因此命名GAST。
方法:在月经周期第2或3天皮下注射GnRH-a制剂0.75~1mg,在注射GnRH-a前和注射后24小时分别测定血清FSH、E2水平。
注射GnRH-a24小时后E2较注射前增加1倍,考虑为卵巢储备功能正常。
注射GnRH-a后24小时E2升高≤1801pmol/ml或增幅<1倍,FSH>10IU/L或给药前后FSH水平之和>26IU/L为GAST异常,预示卵巢储备下降和卵巢低反应。
该方法的特点在于它是定量的,E2峰值水平的高低和成熟卵泡数量、可利用的胚胎的数量成正比,而其余评价卵巢储备功能的方法均是定性的(正常或异常)。但GAST对卵巢储备的预测并不优于AFC、基础FSH及INHB。
研究发现有较大幅度且迅速的E2升高者预示着有良好的治疗结果。GAST的E2变化一般有4种模式:
A、E2迅速地上升,然后D4下降。
B、E2延迟上升,D6下降。
C、E2迅速而持续地上升。
D、E2对GnRH-a无反应。
临床上以A型最多见。临床的妊娠率在这4组中截然不同,它们分别为46%、38%、16%和6%。
A、C型反应提示卵巢高反应,要警惕OHSS的发生。
B型反应正常;
D型提示卵巢低反应。
E2的最大值反映了卵泡的数量和成熟度,GnRH-a激发试验较之基础FSH或年龄更能较好的反映出可利用的成熟卵子数量和可用来种植胚胎的数量。对拟行IVF的患者可以施行GAST,根据早卵泡期E2的反应性,选择控制性超排卵方案。
GAST检查耗时、价格昂贵,仅局限于接受生育辅助治疗的患者做卵巢储备功能检测,尚不能用于预测普通不孕人群的生育潜能。
9.超声检查
9.1卵巢体积
生育力和卵巢体积大小有关,超声检查不仅可了解卵巢体积,亦可观察卵泡数量和大小,能在不孕治疗前或治疗期间较直观地了解性腺的状态和活性。
基础状态(月经第2~3天)的卵巢体积是指在促排卵开始前的卵巢体积。卵巢体积的计算方法是经阴道三维超声测量卵巢3个平面的最大直径D1、D2、D3,体积V=D1×D2×D3×π/6。
基础状态下卵巢体积小与卵巢储备的原始卵泡减少、卵泡生长的数目少有关,但并不与卵子的质量相关。
卵巢体积<3cm3(立法厘米)提示在IVF周期中卵泡发育数、获卵数较少,周期取消率增加。
卵巢体积比基础FSH、E2水平对卵巢储备的预测价值更有意义。尽管基础FSH、E2水平正常,如果有卵巢体积的减少,则卵巢储备力已下降,卵巢体积<3cm3(立方厘米)与卵巢体积>3cm3(立方厘米)者相比,其获卵个数及促排卵失败率有明显差异。
9.2基础窦卵泡数目
Faddy曲线:
人类生育力和卵巢中的卵泡数有关,
卵泡数最佳:18~31岁期间,
卵泡数下降:31~37岁
卵泡数急剧下降:37~45岁
至51岁时卵泡数几乎等于零。
在25~45岁有大量卵泡丧失,25岁时每年卵泡减少率为4%~8%,而37岁时就可上升至12%。
基础窦卵泡数目(basal antral follicle count,bAFC)系早卵泡期阴道超声下检测到的直径2~9mm的窦卵泡数目(AFC预测卵巢储备降低的标准尚存争议)
AFC≤5个,为卵巢储备功能不良,卵巢反应低下的发生率升高,周期取消率显著上升,妊娠率下降。
AFC6~10个时预示卵巢反应正常;
AFC>15个时,预示卵巢高反应,OHSS的发生率较高。
基础AFC可作为一个独立性预测因子,与其他预测卵巢储备功能的指标相比,AFC是预测卵巢低反应性的最好指标。早卵泡期AFC与获卵率、HCG日E2水平呈正相关,而与患者年龄、基础FSH水平、FSH/LH值、Gn用量呈负相关。AFC对卵巢低反应的预测优于FSH。对于基础FSH正常的患者,AFC是一项良好的预测卵巢反应性及IVF结局的指标,在进行COH前早卵泡期通过超声检测窦卵泡数能帮助预测卵巢储备功能。
仅用AFC对预测是否妊娠的效力很差,因为AFC决定卵子的数量,而是否妊娠则取决于卵子的数量和质量。
10.卵巢动脉血流
卵巢动脉血流可作为反映卵巢储备功能的指标。在IVF-ET周期,监测卵巢血流,可在用药前预测卵巢反应性及卵泡成熟度,选择高质量胚胎进行移植,从而提高ART的妊娠率,也可预测卵巢对促排卵的反应情况。采用彩色多普勒监测基础状态下卵巢间质动脉血流指标,血流速度峰值(PSV)、阻力指数(RI)、搏动指数(PI)以及收缩期/舒张期流速比值(S/D)等。具体判读为:
RI、PI、PSV、S/D低,说明血管阻力低,卵巢和子宫血流灌注好,卵巢储备较好。
S/D、RI、PI高,反映卵巢和子宫血流阻力高,灌注差,存在供血障碍,卵泡缺血缺氧,可使卵泡的发育、激素分泌受到影响,导致IVF周期不仅获卵数减少,进而使卵母细胞、胚胎质量和着床率、妊娠率下降。
目前,卵巢动脉血流与卵巢反应性的研究不多,尚不能用于临床上卵巢储备测定